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基因轉殖小鼠產製服務

 

 

原核顯微注射Pronuclei microinjection) 

(凡使用本實驗室服務完成論文發表者,請於論文致謝欄加註本實驗室的參予)                                                                       

         A. 事前準備:在申請基因轉殖實驗前,必須先瞭解以下事項。

1.已完成轉殖基因之構築。

2.已確立有效篩選轉殖基因之方法。(如Genomic PCR, Southern blot, 其中Southern blot為必須完成者

3.有足夠的動物房空間可供基因轉殖小鼠繁殖 。

4.瞭解基因轉殖之特性,例如有些基因受限於其自然特性,無法獲得基因轉殖小鼠。

B.   小鼠品系:TMCL提供純品系FVB/N及純品系C57/B6小鼠為主要對象。其它品系則暫不提供。

C.   已構築完成之質體必須可以利用常用的限制酵素處理後,分成轉殖基因及載體等兩個以上之片段。為避免各片段間之污染,每一片段必須相差1Kb以上

D.   為使基因轉殖之效率提高,以下幾點請遵守:

1.   請以新製備完成之轉殖基因質體進行實驗。

2.   構築完成之質體請勿先行以限制酵素處理後儲存,待TMCL人員通知後再行處理。

3.   處理完成之質體必須在10μg以上,體積不超過100μl。送交DNA時必須附上電泳圖,清楚標示欲轉殖基因之片段。

4.   送交DNA時必須填寫實際之濃度,並提供可證明之資料。(如O.D. 及可定DNA濃度之電泳圖)

5.   以限制酵素處理完成之DNA必須截切完全反應,否則TMCL得予以退件。

E.   每一個案將至少提供三隻帶有轉殖基因之小鼠,若同一轉殖基因要求更多之基因轉殖小鼠應視為另一個新個案。在TMCL正常之操作程序下,若因不可抗力之因素而無基因轉殖小鼠或數量不足,TMCL將重做一次,爾後結束此一個案。

F.   進行注射後五個星期,TMCL將通知申請者取回小鼠尾巴。申請人必須在兩個星期內回覆並附上篩選結果,領回小鼠。

G.   TMCL不負責基因轉殖小鼠後續之代養及繁殖。

H.   所有申請時所需填之表格,均應詳細填寫。若有填寫不清之處,應予補上後才完成申請。在個案進行中需填寫之表格,亦需一一詳細填寫。共有以下表格需填寫:

N0.1  Pronuclei microinjection order form-申請時

N0.2  Prescreen confirmation form-申請時

N0.3  DNA material condition form-送交DNA

N0.4  Tail sample release form-取回尾巴時

N0.5  Animal release form-領回動物時

I.    收費標準

1.  

項目

校內計費標準

校外計費標準

動物飼養費

8000

20000

耗材費

10000

25000

人力技術費

10000

30000

儀器折舊

2000

5000

總計

30000

80000

 

2.   個案開始進行時即行收費 。

3.   委員會得視實際情況調整收費。